GRAMNEGATIIVISTEN SAUVABAKTEERIEN NÄKYMINEN : SYVISTÄ MÄRKÄNÄYTTEISTÄ GRAMVÄRJÄYKSESSÄ

Abstract

Gramvärjäys on mikrobiologiassa bakteriologinen perustutkimus. Sitä voidaan käyttää nopeaan diagnostiikkaan, sillä se antaa tärkeää ensitietoa mahdollisesta taudinaiheuttajasta. Gramvärjäytymisen perusteella bakteerit pystytään jakamaan karkeasti grampositiivisiin ja gramnegatiivisiin bakteereihin sekä muodon perusteella sauvoihin ja kokkeihin. Gramvärjäysautomaatti nopeuttaa työskentelyä, koska automaatilla pystytään värjäämään useampien näytteiden objektilasit samanaikaisesti. Opinnäytetyön tarkoituksena oli selvittää näkyvätkö gramnegatiiviset sauvabakteerit syvistä märkänäytteistä gramvärjäyksessä, kun vastavärin voimakkuutta nostetaan. Työ saatiin toimeksiantona Itä-Suomen laboratoriokeskuksen liikelaitoskuntayhtymän (Islab) Joensuun mikrobiologian aluelaboratoriolta. Laboratorion ongelmana on ollut syvien märkänäytteiden gramnegatiivisten sauvabakteerien näkyminen gramvärjäyksessä. Opinnäytetyö toteutettiin värjäämällä potilasnäytteiden objektilasit voimakkaammalla vastavärin asetuksella kuin millä laboratorio on normaalisti objektilasit värjännyt. Värjätyt objektilasit mikroskopoitiin ja havaintoja verrattiin laboratorion värjäämiin objektilaseihin sekä bakteeriviljelytuloksiin. Tulokset kerättiin taulukoihin, joista niitä pystyttiin vertailemaan. Tuloksien perusteella vastavärin voimakkuuden nostamisella gramvärjäyksessä ei ollut merkitystä gramnegatiivisten sauvabakteerien näkyvyyteen. Jatkotutkimusaiheena voisi olla vastavärin vaihtaminen kokonaan toiseksi tai näytteen laadun vaikutuksen tutkiminen gramvärjäyksessä.

Gram stain is a bacteriological basic analysis in microbiology. Gram stain can be used in quick diagnostics, because it gives important first information of a possible pathogen. Based on gramdiscoloration bacteria can be divided roughly into grampositive and gramnegative bacteria. Based on the form bacteria can be divided in to rods and coccus. An automated gram stainer speeds up the work, because more samples can be stained with it simultaneously. The purpose of this study was to solve if gramnegative rodbacteria are more viewable from the deep wet samples, when the intensity of the counterstaining is raised in the gram stain. This study was commissioned by Eastern Finland Laboratory Centre Joint Authority Enterprise (Is-lab), Microbiology Laboratory of Joensuu. The laboratory has had problems with the visibility of gramnegative rodbacteria from deep wet samples in gram stain. This study was accomplished by staining patient samples’ objectslides with stronger intensity of the counterstain setting than what the laboratory has normally stained the objectslides with. The stained objectslides were examined at a microscope and the findings were compared to the objectslides which the laboratory had stained and also to the results of the bacterial culture made by the laboratory. The results were collated in a worksheet, where they could be compared. Based on the results, raising the intensity of counterstaining in gram staining, had no relevance in the visibility of gramnegative rodbacteria. A topic for further research could be changing coun-terstaining entirely to some other counterstaining or investigating how the quality of the samples effects the staining.