Antigeenispesifisten lymfosyyttien proliferaatiotestin optimointi

Abstract

Ruoka-aineallergiat ovat alle kouluikäisten lasten yleisin allergia. Pienillä lapsilla ravitsemukselle tärkeistä ruokaaineista johtuvaa allergiaa aiheuttavat usein maito sekä viljat.

Opinnäytetyömme toteutettiin osana Oulun yliopiston mikrobiologian ja immunologian yksikössä toimivan dosentti Petri Kulmalan työryhmän projektia, jossa selvitetään lym- fosyyttien toimintaa ja ominaisuuksia terveillä ja ruoka-allergioista kärsivillä lapsilla.

Tehtävänämme oli laboratoriokokein selvittää, mikä olisi eräiden vehnä- ja maitoproteiinien optimaalinen pitoisuus valkosolujen in vitro -proliferaatiotestissä. Kullakin tutkimukseen valitulla proteiinilla on osoitettu olevan keskeinen asema kyseisessä ruoka-aineallergiassa.

Tavoitteena oli tutkia proteiinikonsentraation vaikutusta solujen proliferaatioon, siten että löytäisimme alimman vasteen antavan proteiinikonsentraation. Vasteella tarkoi- tamme lymfosyyttien jakaantumista. Toinen opinnäytetyössä selvitettävä asia oli interleukiini-2-sytokiinin eli kasvutekijän lisäämisen vaikutus proliferaatioon.

Laboratoriokokein löysimme lähes kaikille antigeeneille optimaalisen konsentraation, ja interleukiini-2:n lisäämisellä oli todistetusti selkeä yhteys soluproliferaatiota lisäävästi.

The basis of our study was the demand for optimization of an antigen specific lymphocyte proliferation test. This study was done under the supervision of University of Oulu Faculty of Medicine. It was part of a bigger research concerning lymphocyte features and interactions among healthy and food-allergic children.

The first aim of our thesis was to find the lowest amount of protein that causes a reaction i.e. lymphocyte proliferation in a in vitro experiment. The second aim was to study how interleukin-2 affects the proliferation.

This quantitative in vitro research was done through isolation of human lymphocytes,dyeing the cells and proliferating for six days. After proliferation cells were dyed and then measured with a flow cytometer.

Based on the results we found out the lowest amounts of each protein that will have an effect on a healthy person. It was also proven that interleukin-2 has an increasing effect on the proliferation.