Alendronaatin määrittäminen korkean erotuskyvyn nestekromatografialla : Menetelmän kehittäminen ja validointi
Järvelä-Stölting, Mirva (2012)
Järvelä-Stölting, Mirva
Tampereen ammattikorkeakoulu
2012
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2012060812309
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2012060812309
Tiivistelmä
Bisfosfonaatit ovat farmakologisesti aktiivisia kemiallisia yhdisteitä, joita käytetään osteoporoosin ehkäisyssä ja hoidossa. Rakenteensa puolesta bisfosfonaatit muistuttavat epäorgaanista pyrofosfaattia ja ovat polaarisia yhdisteitä. Bisfosfonaatit sitoutuvat voimakkaasti luuhun ja estävät luuta hajottavien osteoklastien toimintaa.
Korkean erotuskyvyn nestekromatografia on yleisesti käytetty analyysimenetelmä, joka soveltuu useiden yhdisteiden yhtäaikaiseen analysointiin samasta näytteestä. Etuna on lisäksi sen muunneltavuus, joka mahdollistaa menetelmän käytön useissa erilaisissa sovelluksissa. Opinnäytetyössä käytettiin UV-Vis-detektorilla varustettua korkean erotuskyvyn nestekromatografia alendronaatin määrittämiseen.
Alendronaatti on kliinisessä käytössä oleva typpeä sisältävä bisfosfonaatti. Haasteita alendronaatin analysointiin tuo sen rakenteesta puuttuva kromofori, jonka vuoksi alendronaatti ei absorboi UV-alueella. Derivatisoimalla alendronaatti sopivalla yhdisteellä, kuten o-ftaalidialdehydillä, voidaan muodostaa UV-alueella absorboiva kompleksi, joka on mahdollista havaita UV-Vis-detektorilla.
Opinnäytetyössä kehitettiin ja validoitiin menetelmä alendronaatin määrittämiseksi korkean erotuskyvyn nestekromatografialla. Määritysmenetelmän soveltuvuutta erilaisille näytematriiseille tutkittiin määrittämällä alendronaattia puskurista, mediumista ja seerumista. Työssä todettiin kehitetyn menetelmän soveltuvuus käyttötarkoitukseensa. Menetelmän osoitettiin soveltuvan alendronaatin analysointiin vesi- ja puskurinäytteistä. Kehitettyä menetelmää voidaan jatkossa hyödyntää alendronaatin määrittämiseen erilaisista biologisista näytteistä.
Korkean erotuskyvyn nestekromatografia on yleisesti käytetty analyysimenetelmä, joka soveltuu useiden yhdisteiden yhtäaikaiseen analysointiin samasta näytteestä. Etuna on lisäksi sen muunneltavuus, joka mahdollistaa menetelmän käytön useissa erilaisissa sovelluksissa. Opinnäytetyössä käytettiin UV-Vis-detektorilla varustettua korkean erotuskyvyn nestekromatografia alendronaatin määrittämiseen.
Alendronaatti on kliinisessä käytössä oleva typpeä sisältävä bisfosfonaatti. Haasteita alendronaatin analysointiin tuo sen rakenteesta puuttuva kromofori, jonka vuoksi alendronaatti ei absorboi UV-alueella. Derivatisoimalla alendronaatti sopivalla yhdisteellä, kuten o-ftaalidialdehydillä, voidaan muodostaa UV-alueella absorboiva kompleksi, joka on mahdollista havaita UV-Vis-detektorilla.
Opinnäytetyössä kehitettiin ja validoitiin menetelmä alendronaatin määrittämiseksi korkean erotuskyvyn nestekromatografialla. Määritysmenetelmän soveltuvuutta erilaisille näytematriiseille tutkittiin määrittämällä alendronaattia puskurista, mediumista ja seerumista. Työssä todettiin kehitetyn menetelmän soveltuvuus käyttötarkoitukseensa. Menetelmän osoitettiin soveltuvan alendronaatin analysointiin vesi- ja puskurinäytteistä. Kehitettyä menetelmää voidaan jatkossa hyödyntää alendronaatin määrittämiseen erilaisista biologisista näytteistä.