cDNA-kirjaston valmistuksessa käytettäviä geenitekniikan menetelmiä
Jänkälä, Saana-Mari (2011)
Oulun seudun ammattikorkeakoulu
2011
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2011122119091
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2011122119091
Tiivistelmä
Geenitekniikan menetelmissä hyödynnetään tietoja nukleiinihappojen eli DNA:n ja RNA:n rakenteesta ja toiminnasta, proteiinisynteesistä sekä geenien sääte-lystä. DNA:han sisältyy solun perinnöllinen tieto, jonka ilmentämisessä eli proteiinisynteesissä RNA toimii. Kun tutkitaan eukaryoottien geenien toimintaa, valmistetaan usein cDNA-kirjastoja. Tällöin saadaan mukaan ne geenit, joita kyseisellä hetkellä solussa ilmennetään. cDNA-kirjasto on siis edustava koko-elma näytteen mRNA-populaatiosta eli transkriptomista tietyllä hetkellä.
Opinnäytetyön tarkoituksena on perehtyä kirjallisuuteen perustuen yhdistelmä-DNA -tekniikassa käytettäviin menetelmiin. Työssä käydään läpi geneettisen tiedon kulkua DNA:sta mRNA:n kautta aina proteiinisynteesiin saakka sekä hieman geenien toiminnan säätelyä. Työssä tulee selvitettyä myös erityisesti cDNA-kirjaston valmistukseen liittyviä geeniteknisiä menetelmiä lähtien RNA:n eristyksestä, PCR-monistusten sekä vektorin valmistamisen kautta E. coli -solujen transformointiin.
Työn kokeellinen osuus tehtiin Oulun yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan fysiologian laitoksella vuonna 2008 ja työn valvojana toimi tutkija, filosofian tohtori Johanna Veijola. Opinnäytetyö ei kuitenkaan sisällä varsinaista kokeel-lista ja tuloksia sisältävää osiota, vaan on tehty kirjallisuuteen perustuen liittyen kokeellisessa osuudessa cDNA-kirjaston valmistuksessa koettuihin asioihin ja menetelmiin.
Opinnäytetyön tarkoituksena on perehtyä kirjallisuuteen perustuen yhdistelmä-DNA -tekniikassa käytettäviin menetelmiin. Työssä käydään läpi geneettisen tiedon kulkua DNA:sta mRNA:n kautta aina proteiinisynteesiin saakka sekä hieman geenien toiminnan säätelyä. Työssä tulee selvitettyä myös erityisesti cDNA-kirjaston valmistukseen liittyviä geeniteknisiä menetelmiä lähtien RNA:n eristyksestä, PCR-monistusten sekä vektorin valmistamisen kautta E. coli -solujen transformointiin.
Työn kokeellinen osuus tehtiin Oulun yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan fysiologian laitoksella vuonna 2008 ja työn valvojana toimi tutkija, filosofian tohtori Johanna Veijola. Opinnäytetyö ei kuitenkaan sisällä varsinaista kokeel-lista ja tuloksia sisältävää osiota, vaan on tehty kirjallisuuteen perustuen liittyen kokeellisessa osuudessa cDNA-kirjaston valmistuksessa koettuihin asioihin ja menetelmiin.