Useiden eri lääkeaineiden kvantitatiivinen määrittäminen verestä GC/EI-MS:lla - menetelmän kehittäminen ja validointi
Peltokoski, Brita (2008)
Peltokoski, Brita
Metropolia Ammattikorkeakoulu
2008
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-200812034205
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-200812034205
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Kansanterveyslaitoksen Huumetutkimusyksikössä. Työn tavoitteena oli kehitellä useiden eri lääkeaineiden kvantitatiivista määritystä varten luotua menetelmää lisäämällä siihen uusia analysoitavia yhdisteitä ja sisäisiä standardeja. Lopuksi menetelmä validoitiin uudelleen.
Menetelmän kehittämisvaiheessa päätettiin, mitä yhdisteitä alkuperäisestä menetelmästä poistetaan ja mitä lisätään. Uusien yhdisteiden testiajojen jälkeen yhdisteiden lopulliseksi määräksi muodostui 28 analysoitavaa yhdistettä ja kuusi sisäistä standardia. Validointivaiheessa tutkittiin lineaarisuutta, selektiivisyyttä, toistettavuutta, määritysrajaa, derivatisoinnin stabiilisuutta, uuton saantoa ja mittausepävarmuutta.
Menetelmällä analysoitavat lääkeaineet on jaoteltu kuuteen ryhmään: trisykliset antidepressantit ja muut masennuslääkkeet, selektiiviset serotoniinin takaisinoton estäjät, opioidit, fentiatsiinin johdokset ja muut antipsykootit, lihasrelaksantit sekä unilääkkeet ja hallusinogeenit.
Näytteiden esikäsittelyssä analysoitavat yhdisteet uutetaan näytematriisista orgaaniseen liuottimeen emäksisissä olosuhteissa. Uuton jälkeen uuttoliuotin haihdutetaan, yhdisteet liuotetaan haihdutusjäännöksestä asetonirtiiliin ja lopuksi derivatisoidaan. Analysointi suoritetaan kaasukromatografi-massaspektrometrilla kohdeioniseurantaa käyttäen.
Validointitulosten perusteella menetelmällä voidaan määrittää kvantitatiivisesti 24 eri yhdistettä kuuden sisäisen standardin avulla. Lisäksi menetelmästä löytyy neljä semikvantitatiivista yhdistettä, jotka eivät täyttäneet validoinnissa kaikkia kvantitatiivisen määrityksen kriteereitä.
Menetelmän kehittämisvaiheessa päätettiin, mitä yhdisteitä alkuperäisestä menetelmästä poistetaan ja mitä lisätään. Uusien yhdisteiden testiajojen jälkeen yhdisteiden lopulliseksi määräksi muodostui 28 analysoitavaa yhdistettä ja kuusi sisäistä standardia. Validointivaiheessa tutkittiin lineaarisuutta, selektiivisyyttä, toistettavuutta, määritysrajaa, derivatisoinnin stabiilisuutta, uuton saantoa ja mittausepävarmuutta.
Menetelmällä analysoitavat lääkeaineet on jaoteltu kuuteen ryhmään: trisykliset antidepressantit ja muut masennuslääkkeet, selektiiviset serotoniinin takaisinoton estäjät, opioidit, fentiatsiinin johdokset ja muut antipsykootit, lihasrelaksantit sekä unilääkkeet ja hallusinogeenit.
Näytteiden esikäsittelyssä analysoitavat yhdisteet uutetaan näytematriisista orgaaniseen liuottimeen emäksisissä olosuhteissa. Uuton jälkeen uuttoliuotin haihdutetaan, yhdisteet liuotetaan haihdutusjäännöksestä asetonirtiiliin ja lopuksi derivatisoidaan. Analysointi suoritetaan kaasukromatografi-massaspektrometrilla kohdeioniseurantaa käyttäen.
Validointitulosten perusteella menetelmällä voidaan määrittää kvantitatiivisesti 24 eri yhdistettä kuuden sisäisen standardin avulla. Lisäksi menetelmästä löytyy neljä semikvantitatiivista yhdistettä, jotka eivät täyttäneet validoinnissa kaikkia kvantitatiivisen määrityksen kriteereitä.